蚂蚁彩票

欢迎光临上海懋康生物科技有限公司
主页 > 产品中心 > 生化试剂 > 抗生素/抗真菌素 > MS0009PZeocin (Powder) 博莱霉素 抗生素
产品中心
Zeocin (Powder) 博莱霉素 抗生素

Zeocin (Powder) 博莱霉素 抗生素

简要描述:

Zeocin (Powder) 博莱霉素 抗生素 Zeocin是一种作用于真核和原核细胞的选择性抗生素。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性,该基因编码一种13,665Da大小的蛋白,以化学计量方式结合Zeocin,抑制其DNA双链切割活性。

产品时间:2019-07-08

打印当前页

分享到:

Zeocin (Powder) 博莱霉素

 

产品标签

Zeocin 博莱霉素(博来霉素);Phleomycin 腐草霉素;Sh ble基因;Hygromycin B潮霉素B;G418 遗传霉素;CAS NO.:11006-33-0

 

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Zeocin (Powder) 博莱霉素(粉末) 

MS0009P-100MG

100mg

460

Zeocin (Powder) 博莱霉素(粉末) 

MS0009P-500MG

500mg

1660

Zeocin (Powder) 博莱霉素(粉末) 

MS0009P-1000MG

1g

3160

【提示1】:另现货供应Invitrogen原装进口的Zeocin(博来霉素); 

【提示2】:另现货供应母液形式的Zeocin(博来霉素),使用更便捷,且价格更经济。

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素(100 mg/ml)

MS0009-125MG

125mg

420

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素(100 mg/ml)

MS0009-1000MG

8×125mg

2850

【提示3】:对Zeocin不敏感的细胞,如丝状真菌和一些酵母菌,建议使用腐草霉素(货号:MS0008-1ML),抗性基因同样为Sh ble。

【提示4】:特价供应含Zeo+基因序列的质粒— pcDNA 3.1/Zeo(+)(Invitrogen of Thermo),序列图谱点击下载文档。 

产品描述

Zeocin是一种作用于真核和原核细胞的选择性抗生素。来自Streptoalloteichus hindustanusSh ble基因赋予Zeocin抗性,该基因编码一种13,665Da大小的蛋白,以化学计量方式结合Zeocin,抑制其DNA双链切割活性。因此,能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞具有Zeocin抗性。

Zeocin是腐草霉素D1Phleomycin D1)的商业名称,是一种铜离子螯合的糖肽抗生素(来源于链霉菌Streptomyces verticillus的突变株),铜离子的存在使其呈蓝色,此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后,二价铜离子(Cu2+)被还原为一价铜离子(Cu+),并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后,Zeocin被活化,嵌入DNA使其断裂,最终导致细胞死亡。Zeocin作用谱广泛,对细菌、真核微生物、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

本品以蓝色粉末形式提供,低内毒素水平,达细胞培养级。通常情况,哺乳动物细胞的筛选浓度范围是50-400 µg/ml,细菌的筛选浓度为25 µg/ml

我司还提供无菌溶液形式的Zeocin(货号:MS0009-125MGMS0009-1000MG),浓度是100mg/ml,使用起来更加方便,只需直接加入培养基到所需工作浓度即可。

产品特性

1) CAS NO.:11006-33-0

2) 外观:蓝色粉末

3) 内毒素:<1 EU/mg

4) 溶解性:易溶于水(>500 mg/ml

5) 质量控制:分别对Zeocin敏感或Zeocin耐性的哺乳动物细胞测定抗生素活性。

保存与运输方法

保存: +4℃干燥保存,至少1年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1) Zeocin粉末容易受潮,一定要注意干燥保存。每一次使用完后需盖紧管子。

2) Zeocin是一种不稳定化合物,在高pH和低pH或存在弱氧化剂的情况下会发生不可逆变性。

3) Zeocin对高浓度酸和碱都很敏感,但短期暴露在弱酸下能耐受。

4) Zeocin对光敏感,需将抗生素,或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

5) Zeocin有毒,操作时需注意防护,切勿与身体或皮肤直接接触。

6) Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

7) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

母液制备

1)将低温保存的Zeocin置于室温回温至少20min,加入适量HEPES buffer(5g/L, pH 7.2±0.1),充分溶解,配制成100mg/ml溶液。2)用0.22µm滤膜过滤除菌。3)溶液置于4℃保存12个月有效,或-20℃保存,18个月有效。

操作步骤(以哺乳动物细胞为例)

【注1】:Zeocin的杀灭机制不同于新生霉素(neomycin)和潮霉素B(hygromycin B),细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin,敏感细胞会出现如下的形态变化:1)细胞体积明显增加(类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应);2)异常的细胞形状包括细胞长臂(long appendages)出现;3)胞浆内出现大型空泡(源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂);4)质膜和核膜破裂,导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损,仅仅以细胞碎片的形式存在。

【注2】:Zeocin抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上,与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】:Zeocin用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml(平均常用浓度为250-400μg/mL)影响筛选浓度的主要因素包括离子强度,细胞类型,细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考,请根据自身实验体系做适当调整。

一、细胞对Zeocin敏感性的确定(杀灭曲线建立)

  • 重新铺板或者将满盘细胞重新分盘,使得细胞密度约25%,按照8个平板/组准备,培养24h,去除旧培养基。
  • 加入含不同浓度Zeocin的筛选培养基,Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml,每个浓度做3个平行;也可根据自身实验体系,设置不同的浓度梯度。
  • 每3-4天更换新鲜的筛选培养基,并观察存活细胞的比例。选择在合适时间(1-2周内)杀死大多数细胞的浓度为最加工作浓度。【】:若是难以在显微观察下区分活细胞,建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量,以确定Zeocin的最适浓度

二、筛选稳定转染细胞系

  • 转染细胞,100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。
  • 转染后,用预热的1X PBS洗涤一次,加入新鲜培养基。
  • 转染48-72h后,用含有最加浓度Zeocin(由灭杀曲线确定)的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落,建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

注】:若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞,按照以下方法克服此类耐性:用含Zeocin培养基进行细胞分盘,置于37°C孵育2-3h,使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C,2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化,使得Zeocin能发挥作用,杀死细胞。

  • 每3-4天更换新鲜的选择培养基,直到出现细胞集落。
  • 挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前,确保培养细胞密度近100%。

、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞:

1)使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养;

2)降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养;

3)使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培yang【根据杀灭曲线来判断】。

 

相关产品 

货号

名称

简单描述

MS0007-1ML

Blasticidin S 杀稻瘟菌素S (灭瘟素)

bsr/BSD基因筛选抗生素

MS0008-1ML

Phleomycin腐草霉素

Sh ble基因筛选抗生素

MS0009-125MG

Zeocin博莱霉素

Sh ble基因筛选抗生素

MS0010-1G

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

neo基因筛选抗生素

MS0011-25MG

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素盐酸盐

pac基因筛选抗生素

MS0003-1G

Hygromycin B 潮霉素B

hph基因筛选抗生素

一 某些哺乳动物细胞的Zeocin工作浓度

Zeocin常用的工作浓度为100μg/ml,但是,最加的工作浓度需要根据细胞类型和实际的实验体系来确定。某些哺乳动物细胞的建议工作浓度列在下表:

细胞系

培养基

Zeocin工作浓度(μg/ml)

B16

RPMI

20-250

CHO

DMEM

100-500

COS

DMEM

100-400

HEK293

DMEM

100-400

HeLa

DMEM

50-100

J558L

RPMI

400

MCF-7

DMEM

100-400

MEFs

DMEM

200-400

THP-1

RPMI

200

 

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承以人为本,以诚为信、合同守信的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

 

Zeocin (Powder) 博莱霉素 抗生素

Zeocin (Powder) 博莱霉素 抗生素

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
  • © 2019 上海懋康生物科技有限公司 版权所有 技术支持:环保在线
  • 电 话:18616957973 传 真:86-021-54736159 QQ号码:1563822900 邮 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市闵行区虹梅南路2588号绿亮科创园1幢A栋321室
  • 百分百彩票网www.dorispedia.com版权所有 总访问量:99684
在线客服 联系方式

服务热线

18616957973

友情链接:大地彩票网  长江彩票官网  千禧彩票网  长江彩票官网  鸿运彩票官网  博发彩票官网  千禧彩票网  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!