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较早公告: CCK-8细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱guo夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CC
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Rhod-4 AM 钙离子荧光探针

Rhod-4 AM 钙离子荧光探针

型    号: MX4508-50UG
报    价: 720
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Rhod-4 AM 钙离子荧光探针的最大激发和发射波长是530nm和555nm。虽Rhod-4最大激发波长是530nm,但在488nm处激发下的信号也相当强。除了能在514nm,532nm和546nm的长波长激发之外,Rhod-4用氩离子激发器在488nm激发下也能得到理想的荧光信号。

MX4508-50UGRhod-4 AM 钙离子荧光探针的详细资料:



Rhod-4 AM, Cell Permeant 离子光探

(长Ca2+光探Rhod-2的升版本)

 

搜索关键词

Rhod-4 AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针;Rhod-2, AM可见光激发波长Ca2+荧光探针Fluo-4Fluo-8 AMCAS NO129787-64-0

 

产品描述

Rhod-2虽然是最受换迎的红色荧光Ca2+荧光探针,但Rhod-2的线粒体定位和细胞中高基底Ca2+信号使其在某些细胞应用中严重受限制。另外,Rhod-2在488nm处很不理想的激发波长使其在某些只有488nm激发光源的仪器比如FLIPRTM上信号很弱。

 

Rhod-4正是根据这些缺陷而改进的,具有以下特征:

A)Rhod-4的最大激发和发射波长是530nm555nm。虽Rhod-4最大激发波长是530nm,但在488nm

激发下的信号也相当强(见Fig 1)。除了能在514nm,532nm和546nm的长波长激发之外,Rhod-4用氩离子激发器在488nm激发下也能得到理想的荧光信号。Rhod-4随着增加的Ca2+浓度荧光信号而增强(555nm发射波长),一旦与Ca2+结合荧光约增强>200倍。由于许多细胞受刺激后的Ca2+浓度提高通常是5~10倍,因此,Rhod-4是一款优秀的检测此范围内Ca2+浓度变化的高灵敏探针。

Fig 1, Rhod-4钠盐在含氯化钙体系内的激发光谱特征。

一旦受激动剂刺激后,Rhod-4在细胞内的荧光明显强于Rhod-2(信噪比)。更重要的是,Rhod-4主要

定位在细胞胞浆内,不像Rhod-2主要定位在线粒体。另外,Rhod-4具更低的温度依赖性的细胞加载特性,不管室温还是37℃产生相似的结果。这一特征使Rhod-4比Rhod-2在HTS应用中更有优势。

 

Rhod-4, AM是Rhod-2的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Rhod-4,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。本品以冻干粉的形式提供,使用时只需经无水DMSO充分溶解,配置成2~5mM的储存液,并依据具体实验和相关文献资料调整到需要的工作浓度即可。

 

基本特性:

1)    同义名:Rhod-4, Acetoxymethyl Ester 

2)    分子量:1015.96

3)    外观:红色固体

4)    最大激发/发射波长:530/555 nm

5)    KdCa2+结合):525nM

6)    溶解性:溶于DMSO2~5mM

 

注意事项

  1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
  2. 乙酰氧基甲基酯(AM)易吸潮,冰箱取出后请在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂微量,开封前请将其短暂离心,以保证粉末落入管底。
  3. Rhod-4, AM4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可在20-25℃温育片刻至全部融解后使用。
  4. Rhod-4, AM第一次使用,建议储存液现配现用,分装成单次用量,严格做到-20℃密封干燥冻存,以防止受潮。为了保证良好的实验效果,尽量在短时间内使用。
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

注意】以下使用方法仅用作参考,可根据具体的实验条件做出调整。

A. 试剂准备

  1. 配制Pluronic F-127母液: 称取100mg Pluronic F-127粉末(货号:MS4301-1G)中加入500μl DMSO,配制成20%(w/v) DMSO母液。溶解过程需要在40-50加热20-30min。溶液室温保存,不用冷藏。如有结晶析出,可以重新加热后溶解,不影响使用。
  2. HHBS Buffer (1X Hank’s Balanced Salt Solution with 20mM HEPES buffer, pH 7.3) 或者其他生理缓冲液

B,操作步骤

7) 用适当的仪器如激光共聚焦、流式细胞仪、荧光酶标仪,以及波长Ex/Em=530/555 nm来进行检测。

 

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货号

产品名称

规格

价格(元)

MX4508-50UG

Rhod-4, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针,超级chun

50μg

720

MX4508-250UG

Rhod-4, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针,超级chun

5×50μg

2800

 

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
 

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Rhod-4 AM 钙离子荧光探针

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