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较早公告: CCK-8细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱guo夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CC
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PKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒

PKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒

型    号: MX4021-100UL
报    价: 946
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PKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒:(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于荧光探针PKH26,用于常规细胞膜标记的检测试剂盒,适用于体外细胞标记,体外细胞增殖以及长期的体内细胞跟踪研究等。

MX4021-100ULPKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒的详细资料:



PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记)

 

产品关键词:

PKH26Calcein AM 钙黄绿素PKH67CFDA SEIn vivo cell tracking 体内细胞示踪;Sigma MINI26Phanos Technologies

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存条件

PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记)

MX4021-100UL

100μl

2-8ºC避光保存

MX4021-200UL

200μl

2-8ºC避光保存

MX4021-500UL

500μl

2-8ºC避光保存

产品描述

PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记)(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于荧光探针PKH26,用于常规细胞膜标记的检测试剂盒,适用于体外细胞标记,体外细胞增殖以及长期的体内细胞跟踪研究等。

PKH26是一种的膜标记探针,结构上带有一长脂肪族尾巴,能稳定插入细胞膜脂质区域。PKH26荧光处于黄-橙色光谱区间(见图1),最大激发波长为551nm,最大发射波长是567nm,与罗丹明或PE检测系统兼容。也可能用标准荧光素(Fluorescein)激发滤片,但荧光强度可能会有些降低。PKH26具最长的体内半衰期,超过100天,非常适用于体内细胞示踪、细胞增殖研究和其他长期实验。

稀释液CDiluent C)是本试剂盒配套提供的一种水溶性溶液,特别设计的一种标记媒介能维持细胞活力,同时最大化染料溶解性和标记过程中的染色效率。Diluent C对哺乳动物细胞来说是等渗的,不含去污剂或有机溶剂,也不含生理盐和缓冲剂。根据细胞类型,染料标记后膜的内在化程度,标记细胞可能呈现不同的状态,从明亮,到均匀点状或斑驳状。然而,PKH26荧光在生理范围内不依赖于pH,且每个细胞的荧光强度通常不受染料位置的影响。

1. PKH26的激发和发射光谱图

我司(懋康生物)提供三种规格的PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记),其中:

Mini KitCAT#MX4021-100UL)建议用于小量或初步研究。当使用2ml染色体积(含2μM 终浓度的PKH26),本试剂盒含有足量的染料用于检测25次细胞样本(2×107个细胞/次),和足量的Diluent C用于5次细胞样本(2×107个细胞/次)。用户需根据细胞类型和实验目的来优化确定最加的染料浓度。

Midi KitCAT#MX4021-200UL)适用于中量研究。当使用2ml染色体积(含2μM 终浓度的PKH26),本试剂盒含有足量的染料用于检测50次细胞样本(2×107个细胞/次),和足量的Diluent C用于30次细胞样本(2×107个细胞/次)。用户需根据细胞类型和实验目的来优化确定最加的染料浓度。

Maxi KitCAT#MX4021-500UL)适用于大量或体内研究。当使用2ml染色体积(含2μM 终浓度的PKH26),本试剂盒含有足量的染料用于检测125次细胞样本(2×107个细胞/次),和足量的Diluent C用于30次细胞样本(2×107个细胞/次)。用户需根据细胞类型和实验目的来优化确定最加的染料浓度

产品包装

组分

名称

货号(规格)

MX4021-100UL

MX4021-200UL

MX4021-500UL

MX4021-A

PKH26 Dye (1×10-3 M in EtOH)

1×100μl

2×100μl

5×100μl

MX4021-B

Diluent C

1×10ml

2×30ml

2×30ml

注意事项

1)   PKH26是以溶于乙醇的储存液形式提供,保存的过程中需避光并拧紧盖子,以防止溶液挥发引起的染料浓度提高。使用前需检查是否有结晶,若有结晶,需在37℃水浴溶晶,超声或涡旋直至完全溶解。

2)   Diluent C使用前需置于室温回温之后再配制标记用的细胞和染料工作液。Diluent C是无菌溶液,不含任何防腐剂或抗生素,使用和保存过程中都注意无菌。

3)   PKH26不能保存在Diluent C内,保存在Diluent C的染色工作液需在使用前配制,现配现用。

4)   荧光染料均存在淬灭问题,操作和储存过程中需注意避光,以减缓荧光淬灭。

5)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、  自行准备仪器和试剂(试剂盒不提供,用于常规细胞膜标记)

二、  常规细胞膜标记

【注意事项】:

1)   通过分配脂质染料进入细胞膜来进行标记。标记强度是染料浓度和细胞浓度共同作用的一种功能,且不会饱和。因此,用来标记的染料浓度需要有限,过度标记细胞会引起细胞膜完整性丧失和降低的细胞复原能力。

2)   以下步骤适用于体外或离体标记干细胞、淋巴细胞、单个核细胞、内皮细胞、神经元或任何需要将染料插入细胞膜脂质区的其他细胞类型。而体内标记、血小板标记,或在含非吞噬细胞的群体内选择性标记吞噬细胞,需对步骤做适当修改。

3)   需在单克隆抗体染色前进行常规细胞膜染色。4℃单克隆抗体染色过程中膜染料仍能维持稳定。然而,如果单抗标记后再室温下进行常规细胞膜染色,极有可能引起单抗的“盖帽”发生。

4)   以下步骤中用到的细胞和染料浓度是推荐用的起始浓度,广谱适用于各种细胞类型。用户需根据自身细胞类型和实验目的确定最加的染料和细胞浓度,通过对染色后细胞活力(比如碘化丙啶排斥),荧光强度,染色均匀性和对待研究细胞功能无影响等方面来综合评估。

5)   PKH26染色过程中需避免叠氮化物或代谢毒物的存在。

6)   虽然粘附在固相基质上的贴壁细胞可能被标记,使用单细胞悬浮液能得到更匀质的染色结果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA处理贴壁或结合细胞制备成分散的单细胞悬液能得到最hao的染色结果。

【染色流程】:

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产品名称

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10mg

 

 

 

 

 

 

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承以人为本,以诚为信、合同守信的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

 

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