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较早公告: (LPS)脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分,脂多糖对宿主是有毒性的。脂多糖只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来,所以叫做内毒素。其毒性成分主要为类脂质A。内毒素位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的粘肽上。那么下面我们来看看(LPS)脂多糖的两种反应。内毒素导致的毒性效应大致类同。这些毒性反应主要有:1、发热反应人体对细菌内毒素极为敏感。极微量(1-5纳克/公斤体重)内毒素就能引起体温上升,发热反应持续约4小时后逐渐消退。自然感染时,因革兰氏阴性菌不断生长繁殖,同时伴有陆续死
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CCK-8 细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明
点击次数:878 发布时间:2018-05-18
 

  CCK-8 细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明

  1. 向各孔中加入100 μl细胞悬液。a)

  2. 在37℃下预孵育培养板。b)

  3. 向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10 μl。

  4. 37℃下孵育。

  5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d)。

  6. 37℃下孵育1-4小时。e)

  7. 测定450 nm处的OD值。

  a) 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。

  b) 建议使用CO2培养箱guo夜预培养。

  c) 使用培养基或PBS来制备溶液。

  d) 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8 ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100 μl培养基和10 μl CCK-8进行检测。

  e) 白细胞可能需要培养较长时间。

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