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较早公告: CCK-8细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱guo夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CC
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DNase I 牛胰腺脱氧核糖核酸酶I (懋康生物整理)
点击次数:230 发布时间:2018-05-01

Deoxyribonuclease I (DNase I) 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

(冻干粉形式,即用型液体形式,懋康生物)

 

关键词:

脱氧核糖核酸酶I DNase I;核糖核酸酶 RNase;全能核酸酶 Benzonase;Sigma D5025; Sigma DN25;CAS:9003-98-9;

 

基本介绍:

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸(见下图反应流程图),平均消化产物zui小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,zui早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是zui主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。zui加的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

 

主要应用:

◇   制备不含DNA的RNA样本;

◇   RT-PCR反应前RNA样本内基因组DNA等可能存在DNA污染的去除;

◇   T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的体外RNA转录后DNA模板的去除;

◇   DNase I足迹法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白质相互作用;

◇   缺口平移法标记探针用;

◇   制备随机DNA片段文库;

◇   TUNEL细胞凋亡检测中用于剪切DNA制备阳性对照;

 

我司(懋康生物MKBio)提供的脱氧核糖核酸酶I(DNase I),来源于牛胰腺,通过亲和色谱纯化所得,不含RNase和蛋白酶污染。为了满足工业用户和科研用户的不同应用需求,我们提供冻干粉(不同比活)和即用型液体形式的DNase I。具体信息如下:

 

一、脱氧核糖核酸酶I(DNase I)(冻干粉形式,比活力≥2000 Kunit U/mg protein)

1.1 产品特征:

1)   CAS NO:9003-98-9

2)   蛋白纯度:≥80%(biuret),色谱纯化

3)   比活力:≥2000Kunit Units/mg protein

4)   活力定义:25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。

5)   激活剂:多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+、 Ca2+、Co2+、and Zn2+

6)   抑制剂:β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白;并没有特异性抑制DNase I酶活的通用抑制剂,比如柠檬酸盐抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影响Mn2+激活的DNase I。

7)   溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),无色透明溶液

 

1.2 订购信息:产品性能媲美Sigma D5025,本品生产至少十年以上,销售到国内各大实验室,欢迎各大工业和科研用户前来咨询。

产品名称

产品编号

规格         

价格          

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

MF0401-15KU   

15KU

380

MF0401-50KU

50KU

980

 

二、脱氧核糖核酸酶I(DNase I)(冻干粉形式,比活力≥500 Kunit U/mg protein)

2.1 产品特征:

8)   CAS NO:9003-98-9

9)   分子量:~31 kDa

10)同义名:DNase I, Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脱氧核糖核酸酶A

11)  比活力:≥500 Kunit Units/mg protein

12)  活力定义:在50µl含40mM Tris-HCl, pH8.0,2.5 mM MgSO4,1mM CaCl2的反应缓冲体系中,37℃,10min内完全降解1µg λ-DNA所需的酶量即为一个活力单位。此反应条件下得到的一个单位DNase活力约等于一个Kuntiz unit。

 

2.2 订购信息:产品性能媲美Sigma DN25。比活低于MF0401(≥2,000 Kunit U/mg protein),价格更加经济。

产品名称

产品编号

规格 

价格        

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein  

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

MF0402-10MG   

10MG     

250

MF0402-50MG

50MG

680

 

三、脱氧核糖核酸酶I(DNase I)(即用型溶液)

该试剂盒形式提供,其中DNase I以即用型溶液(1U/μl) 形式提供,酶经过严格质控能极好的消化模板;还提供10× Reaction Buffer和10× Stop Solution,节省了试剂配制的时间,用起来更加快捷。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。 

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